一. 子宮頸抹片的採取

(1)材料:

• 玻片─寫上病人的姓名和病歷號.
• 子宮頸抹片取樣工具:

1. 木枺板(Ayer spatula)─最常使用, 其頂端能取到子宮內頸細胞, 弧形的部分能取到子宮外頸細胞. 但若子宮頸外翻範圍過大, 或因生產過後子宮頸表面有凹凸不平之疤痕時, 抹片常不易完全取樣, 會漏病灶.
2. 棒(Cotton swab)─較不易損傷表面組織, 不易流血,可輕易在子宮內、外頸採取到檢體. 但是容易發生細胞被棉絮捲去, 貼不到抹片上, 或棉絮纖維殘留在抹片上,使細胞重疊或變形, 造成診斷困擾.
3. 細胞刷(Cyto-brush)─是目前最理想的子宮內頸取樣器.但取樣時較易出血, 且不易取到外頸細胞.
4. 細胞籤(Cyto-pick)─兩端均能使用, 尖端部可取子宮內頸細胞, 齒狀端可取子宮外頸細胞. 但取樣時不宜太用力, 容易造成出血, 且常無法獲得充分標本.
5. 子宮頸刷(Cervix-brush)─為新產品, 可同時取得子宮內、外頸細胞, 但易流血, 對有子宮頸內翻患者時, 深度尚嫌不夠, 必須仔細操作.

• 如果要做陰道液抹片(Vaginal aspiration smear)時, 得準備一根玻璃吸管, 並連接一個橡皮球, 用以把陰道液吸出來.
• 如果要做子宮內膜抹片(Endometrial smear), 得準備一根長而彎的小管, 接在注射筒上, 用以插進子宮內膜腔, 以便把剝落細胞同分泌液吸出來.
• 一個寬口的盛玻片容器, 裡面放著新鮮的固定液. 最常用且方便的固定液是95%乙醇.

(2)方法:

子宮頸抹片是用上述工具, 從子宮頸口柱狀細胞層同鱗狀細胞層之間(Transformation zone), 稍微用力往內壓, 再向左右各旋轉360度, 取得細胞後, 迅速塗抹於乾淨的玻片上, 分布均勻於左側2/3範圍內, 勿用力擠壓或摩擦, 以防止細胞損傷或變形, 並儘快放入固定液內.陰道液抹片是從陰道的頂端或末端, 吸取已分泌於陰道的分泌液, 然後迅速塗抹於玻片上面而製成.製造子宮內膜抹片的方法, 是把注射筒同注射管連接起來, 再插入子宮, 到適當的深度, 然後抽出, 並將抽出的粘液, 塗抹於玻片上面. 這樣造成的抹片粘性很大, 原因是子宮分泌的粘液很多, 把子 宮分泌的粘液, 塗到玻片上面, 自然很容易跟玻片粘連起來. 粘連以後, 即使經過各種染色、沖洗等手續, 細胞也不大容易掉得下來. 這樣就使婦科抹片的製作工作, 方便得多. 不過抹片做好後, 還應該放入固定液內固定, 才算手續完成.

(3)注意事項:

1. 檢查的當天, 病人必須沒有使用藥物沖洗陰部. 同時, 做抹片所用的器具, 也必須保持乾燥, 絕不能沾到水分. 因為如果滲了水分, 會使細胞構造受到損害, 在顯微鏡下觀察時, 會變得不清楚, 將會影響到診斷的效果.
2. 抹片必須塗抹得很薄, 最好是薄到只有單層細胞. 這樣,才能清楚地辨別細胞的形態, 也才能有利於診斷. 否則太厚, 細胞重疊, 染色效果不好, 封片時不易把空氣排空,妨害正確的判讀.
3. 做兩張抹片, 浪費較多的人力和物力, 但達到診斷價值較高. 若做兩張抹片, 一定要兩張抹片同時送檢, 以免造成假陰性.
4. 病人正在月經期中, 不要去採子宮頸抹片. 因為這時血液太多, 會影響診斷. 但若有不正常出血或懷疑有病變時,則隨時可採檢. MC過後13～14天或MC前做抹片最適合.
5. 採樣時抹片要先做, 然後才作內診, 以避免手套上之潤滑油或滑石粉(talc)滲入抹片, 影響診斷.
6. 採集標本與製作抹片, 都必須認真、謹慎、小心, 以達正確的要求. 這樣, 才能增加檢查的效果, 達到診斷的目的.

二. 痰的收集

1. 收集清晨第一口痰, 吩咐病人用力深咳, 把所有的痰咳出.
2. 痰抹片檢查必須一連檢查三天, 才可以達到最高的診斷率.
3. 做完支氣管鏡後, 收集的痰, 做細胞抹片, 最具診斷價值.

三. 體液的收集

1. 胸水、腹水、心包膜水抽出後, 檢體以當天(12小時內)送檢為原則.
2. 如因事延遲, 某些體液含有大量纖維素, 會產生凝固作用, 因此抽出後, 須加入少許抗凝固劑, 搖勻後存於冰箱.

四. 尿液的收集

1. 檢體愈新鮮愈佳. 請患者先排空膀胱內的滯留尿, 再喝500毫升左右開水, 稍後, 第一次排出的尿仍然丟棄, 採取第二次排出的尿,取50毫升2小時以內送檢.
2. 24小時置留尿不適合作細胞檢查. 因為尿液中蛋白質含量較低, 且滲透壓與血液不同, 加上含有各種排泄出來不利細胞生存之物質, 細胞容易變性. 再者, 經過24小時的細菌衍生, 酸鹼性的變化, 細胞容易受到破壞.
3. 導尿管收集的尿液或膀胱沖洗液也可作細胞學檢查, 仍以剛流出導管的新鮮尿為佳, 檢驗單上必需註明是由導尿管收集的檢體或沖洗液.

五. 脊髓液的收集

脊髓液採取後必需在30分鐘內送檢, 以防僅有的少數細胞變性破壞.

　

六. 細針抽吸細胞學採檢技術

細針抽取細胞學(Fine needle aspiration cytology, FNA)是一種迅速又正確的診斷腫瘤的方法, 受過訓練的醫師可以抽取全身從頭到腳的腫瘤及病變, 不管它是可以摸到的腫瘤, 是需靠Ｘ光，超音波技術,才能確定位置的深部腫瘤.

細針抽取抹片的製作方法:

使用20～22號針連接5cc或20㏄注射筒, 以針頭或特製持針器插入腫瘤內,然後用力抽拉注射筒之內管, 使注射筒內產生負壓, 此時再將針頭前後抽動3、4次, 抽動時也可稍微改變方向, 使腫瘤細胞掉入針內, 然後放開注射筒內管以解除筒內負壓, 再抽出針頭, 接著用手將針頭拔開注射筒, 在注射筒內吸入5～10㏄的空氣, 再將針頭接上,利用注射筒內的空氣將針頭內的細胞噴灑在載玻片上, 最後製成抹片.為確定能取得較多的細胞, 可做多處穿刺. 要做Papanicolaou 染色的抹片應立即放入95%乙醇中固定. 供劉氏染色的抹片立刻用吸風機迅速吹乾.

1. 檢查申請單上各項資料是否齊全
2. 核對申請單上之姓名, 病歷號, 檢體名稱與檢體瓶(盒)之標籤是否一致符合
3. 門診檢體和病房檢體以電腦簽收編號
4. 簽收完成

    細胞學的目的是在觀察剝落細胞的微細構造, 如果一個細胞己經退化或死亡, 或取出後沒有立刻固定而被風乾, 其微細構造亦會隨之消失, 如此細胞診斷便不能達成, 所以檢體的固定在抹片的收集過程中, 相當重要, 直接影響細胞診斷的品管.細胞所以能夠被固定, 是因為固定液可以迅速滲透進入細胞膜內, 與其微細構造, 發生理化作用, 防止細胞繼續做趨向於退化或死亡的化學變化.
   固定是為了防止細胞變形或變性, 使染色清晰, 美麗, 其固定方法隨各種染色而不同.

一. 濕固定:

濕固定是Papanicolaou, PAS, mucin等染色法應嚴格遵守的固定方法, 即標本塗抹後, 未乾燥前, 馬上放入固定液中, 動作愈快愈好.

1. 固定液的種類:

• 95%乙醇: 最普通的固定液, 較便宜. 細胞抹片常規染色均可採用. 固定時間15分鐘以上.
• b. 100%乙醇: 固定效果與95%乙醇相似, 但價格昴貴.
• c. 乙醚─酒精: 95%乙醇加純乙醚. 乙醚容易揮發, 以致使純度降低,而影響固定的效果. 同時, 也因乙醚的可燃性很高,容易著火或爆炸, 危險性大.

2. 固定時間太短, 染色性較差. 固定液濃度不夠, 固定效果較差, 影響染色效果. 固定液需經常(若標本量多則至少每日)更換或過濾,以保障良好之固定效果, 並避免固定缸內剝落細胞之附著. 固定缸要用有蓋且可分隔載玻片的容器. 固定時, 每張抹片順序輕輕放入固定缸的間隔裡, 兩張抹片不可正面黏附一起, 以免相互染.

3. 為了攜帶方便, 大量塗片時, 可用噴霧固定法, 其成份是聚乙稀乙二醇(polyethylene glycol)和異丙醇(isopropanol)的混液,裝入普通噴霧器中, 在抹片乾燥前, 從上方約15公分的高度, 均勻的噴灑, 乾燥後就可暫時收存或郵寄, 此噴霧法一方面固定細胞, 另一方面在抹片上形成一層薄薄的保護膜, 因此在染色前需再用95%乙醇浸泡數分鐘, 洗去上層的固定薄膜即可. 但有人報告用噴霧法固定之細胞較易出現含空泡之細胞.

二. 乾燥固定:

劉氏染色、Giemsa染色的抹片, 塗抹後用電風扇或吹風機幫忙迅速吹乾. 乾燥固定後的抹片為防細胞變形或變性, 不宜放置太久, 以免妨礙染色效果.